新药技术开发系列讲座第69讲

生物影像平台本次讲座主要针对平台即将试用的近红外激光共聚焦荧光寿命显微成像系统(STELLARIS 8 FALCON，LEICA)，该系统与传统共聚焦相比有以下优势：i 激光器激发范围(405、440-790nm连续可调)和检测器检测范围(410-850 nm)更广，可见光和红外范围均可进行多色成像。ii 配备快速荧光寿命成像，可以通过 FLIM-FRET(荧光共振能量转移)跟踪分子间的快速相互作用、使用生物传感器检测代谢状态和微环境的变化、通过寿命对比区分多个荧光团或去除自发荧光。

广大师生可于2022年3月16日-2022年4月15日免费预约使用仪器。欢迎大家扫码进群，共同学习交流！

• 主讲人：李叶昕(徕卡显微系统应用工程师)

• 时　间：2022年03月16日 10:00-11:00

• 腾讯会议ID：145-644-373

• 会议密码：220316

• 主持人：李文哲 82805217

近红外端的多色成像

Cos-7细胞图像，使用SiR-Actin(657 – 740nm探测范围)、AF750-Tom20(760 – 790nm)、AF790-Tubulin(810 – 850nm)标记。

FLIM-FRET在生物成像中的应用

HeLa 细胞中的笼锁cAMP（环磷酸腺苷），表达 EPAC mT2-dVenus FRET 传感器。EPAC对紫外线介导的cAMP（环磷酸腺苷）解笼锁的反应（中心区域）。视频采集速度4帧/秒。图像大小：256 x256 像素。颜色条的尺度（寿命）：ns。

基于FLIM的信号拆分

TauSense是一组基于荧光寿命的成像工具，是与荧光强度无关的一种对比形式。这组成像工具包括TauContrast、TauGating和TauSeparation: TauContrast技术利用荧光寿命会随着酸碱度或离子浓度等荧光团的微环境而改变的性质，获得代谢状态、酸碱度和离子浓度等实时变化信息；TauGating能够识别荧光信号中不同的光子到达时间，从而消除内源荧光、自发荧光、色素或反射等非特定的信号；TauSeparation工具不是基于荧光光谱，而是基于荧光寿命来区分样本，拆分通道提供更多通道可能性。

产品信息来源：

Brochure_STELLARIS_MC0000752_30112020.pdf (leica-microsystems.com)

STELLARIS 8 FALCON FLIM 共聚焦显微镜 | 产品 | 徕卡显微系统 (leica-microsystems.com.cn)

SP8 FALCON: a novel concept in fluorescence lifetime imaging enabling video-rate confocal FLIM | Science Lab | Leica Microsystems (leica-microsystems.com)